中央空調(diào)冷卻水軍團(tuán)菌檢測方法簡介

　　近些年冬天冷夏天熱，空調(diào)的使用率大大增加，但要當(dāng)心空調(diào)冷卻水中的隱形殺手----軍團(tuán)菌。由軍團(tuán)菌引起的軍團(tuán)菌病是非典型肺炎的重要組成部分，是一種暴發(fā)流行或散發(fā)流行的嚴(yán)重呼吸道傳染病，世人第一次認(rèn)識軍團(tuán)病是在1976年7月，那時(shí)美國費(fèi)城召開了第56屆美國退伍軍人年會，與會者中有182人發(fā)生肺炎，事后在病人肺組織中接種分離出一種致病菌，這種病菌來自旅館的空調(diào)系統(tǒng)，以后醫(yī)學(xué)界將這種病菌命名為嗜肺軍團(tuán)菌，把因這種病菌引起的疾病稱為軍團(tuán)病。軍團(tuán)菌是一種水中的細(xì)菌，不僅存在于自然界水中，也存在于污染的水塔水、熱水、礦泉水中。隨著我國人民生活水平的提高，尤其是大型建筑物，如賓館、醫(yī)院公共設(shè)施等中央空調(diào)系統(tǒng)的使用日益普遍，軍團(tuán)病爆發(fā)流行的危險(xiǎn)性也日益增加，因此了解和掌握空調(diào)冷卻水中軍團(tuán)菌的檢測方法，在預(yù)防和控制軍團(tuán)病的發(fā)生與流行中有十分重要的作用?，F(xiàn)將其實(shí)驗(yàn)室檢測方法作簡單介紹。本文由永安昌盛中央空調(diào)維修網(wǎng)的小編轉(zhuǎn)載于互聯(lián)網(wǎng)。

　　一、 細(xì)菌培養(yǎng)和鑒定

　　1.樣品處理：水樣中的菌經(jīng)過濾膜或離心濃縮，為減少雜菌生長，濃縮樣品的一部分經(jīng)酸處理與熱處理，一部分不做處理，將上述處理與未處理樣品分別接種GVPC瓊脂平板，在5% CO2，35~36℃環(huán)境下培養(yǎng)7一lOd。

　　2.初步鑒定：軍團(tuán)菌的菌落顏色多樣，通常呈白色、灰色、藍(lán)色或紫色，也能顯深褐 色、灰綠色、深紅色。軍團(tuán)菌在GVPC選擇性平板上可形成直徑1～2 mm、灰白色、圓形、表面光滑、邊緣清楚整齊的菌落，在紫外燈下，有熒光，為革蘭氏陰性桿菌。在選擇性平板上挑選可疑菌落，接種于BCYE瓊脂平板和 BCYE-Cys平板進(jìn)行傳代培養(yǎng)，36±1℃培養(yǎng)至少 2d，凡在前者上生長而在后者上不生長的即為軍團(tuán)菌。

　　3.生化鑒定：常用的生化實(shí)驗(yàn)有糖發(fā)酵試驗(yàn)、淀粉水解試驗(yàn)、觸酶試驗(yàn)、明膠液化試驗(yàn)、內(nèi)酰胺酶試驗(yàn)、硝酸鹽還原試驗(yàn)、尿素酶試驗(yàn)、馬尿酸鹽水解試驗(yàn)等。

　　二、分型鑒定：采用軍團(tuán)菌乳膠凝集試劑盒進(jìn)行分型診斷，我國常見的型別有Lp1、Lp3、Lp5、Lp6、Lp9等。

　　三、PCR 法檢測菌株特異系性基因：主要檢測基因種類為軍團(tuán)菌屬特異基因5sRNA、16sRNA和嗜肺軍團(tuán)菌種特異基因Mip基因。

　　四、其他檢測方法：常用的方法有放射免疫法(R1A)、酶免疫法(EIA)、直接熒光抗體法(DFA)、免疫層析法(ICA)等多種方法;此外，核酸探針技術(shù)是近幾年發(fā)展起來的一種快速診斷軍團(tuán)菌病原體的方法，根據(jù)軍團(tuán)菌的核酸序列合成一段寡核苷酸，用同位素標(biāo)記，并與被檢測核酸分子雜交，通過檢測放射性信號，確定軍團(tuán)菌感染。這種方法具有特異性高，快速等優(yōu)點(diǎn)。

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